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    ア ァ カ サ ザ タ ダ ナ ハ バ パ マ ヤ ャ ラ ワ ヮ ン イ ィ キ ギ シ ジ チ ヂ ニ ヒ ビ ピ ミ リ ウ ゥ ク グ ス ズ ツ ヅ ッ ヌ フ ブ プ ム ユ ュ ル エ ェ ケ ゲ セ ゼ テ デ ヘ ベ ペ メ レ オ ォ コ ゴ ソ ゾ ト ド ノ ホ ボ ポ モ ヨ ョ ロ ヲ ―

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    § ※ ☆ ★ ○ ● ◎ ◇ ◆ □ ■ △ ▽ → ← ↑ ↓ ↔ 〓 ◁ ◀ ▷ ▶ ♤ ♠ ♡ ♥ ♧ ♣ ⊙ ◈ ▣ ◐ ◑ ▒ ▤ ▥ ▨ ▧ ▦ ▩ ♨ ☏ ☎ ☜ ☞ † ‡ ↕ ↗ ↙ ↖ ↘ ♭ ♩ ♪ ♬ ㉿ ㈜ № ㏇ ™ ㏂ ㏘ ℡ ＃ ＆ ＊ ＠ ª º
    ⅰ ⅱ ⅲ ⅳ ⅴ ⅵ ⅶ ⅷ ⅸ ⅹ Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ Ⅷ Ⅸ Ⅹ
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    Neuroprotection of dopaminergic neurons by Hominis Placenta herbal acupuncture in in vitro and in vivo models of Parkinson’s disease induced by MPP+/MPTP toxicity

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    https://www.riss.kr/link?id=T12699859

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    최근 한의학에서 널리 사용되며, 신경계 질환에도 응용 가능성을 보이고 있는 자하거 약침의 신경보호효과를 알아보기 위하여, 신경 퇴행성 질환인 파킨슨 씨 병에 대하여 in vitro/in vivo 실험을 통해 자하거 약침의 신경보호효과와 행동검사 결과를 관찰하였다.
    본 연구에서 자하거 약침은 in vitro 실험에서 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP+)투여로 인한 신경세포 손상에 대하여 신경보호효과의 가능성을 보였다. 이를 근거로 시행한 in vivo 실험에서는 C57BL/6 mice를 사용하여 실험군을 정상군, 신경독소인 1-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine(MPTP)만 주입한 군, 족삼리에 식염수를 주입하면서 MPTP를 주입한 군, 족삼리에 자하거 약침을 주입하면서 MPTP를 주입한 군의 4군으로 나누었다. 자하거 약침은 MPTP 주입 전에 양측 족삼리에 4주간 격일로 12회 주입하였고 자하거 약침 8회 시술 후부터 MPTP를 하루에 한 번 5일간 복강내 주입하여 중뇌의 흑질의 도파민 신경세포를 파괴하여 Parkinson 질병동물 모델을 만들어 자하거 약침의 세포손상에 대한 예방효과 및 신경보호효과를 관찰하였다. 실험이 끝난 후 행동검사는 pole test와 rota-rod test를 시행하였고 세포의 보존정도는 도파민 세포를 TH 면역조직 화학법을 통해 측정하였다.
    관찰결과 MPTP 투여 후 MPTP 투여군의 흑질의 도파민 세포수는 감소하였으나 자하거 약침을 투여한 경우에는 세포수가 유지되는 경향성을 보였으나 유의성은 없었다. 행동검사에서도 양호한 경향성은 나타내었으나 유의성이 나타나지 않았다.
    Parkinson 모델 실험을 통해 자하거 약침은 세포손상예방 및 신경보호효과의 가능성을 보였으나 유의성 있는 결과는 나타내지 못했으므로, 추후 적절한 경혈, 투여방법 및 최적의 농도를 찾는데 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

    Key words : Hominis Placenta herbal acupuncture, Parkinson’s disease, MPP+, MPTP, Behavioral test, TH-immunohistochemistry
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    최근 한의학에서 널리 사용되며, 신경계 질환에도 응용 가능성을 보이고 있는 자하거 약침의 신경보호효과를 알아보기 위하여, 신경 퇴행성 질환인 파킨슨 씨 병에 대하여 in vitro/in vivo 실험...

    최근 한의학에서 널리 사용되며, 신경계 질환에도 응용 가능성을 보이고 있는 자하거 약침의 신경보호효과를 알아보기 위하여, 신경 퇴행성 질환인 파킨슨 씨 병에 대하여 in vitro/in vivo 실험을 통해 자하거 약침의 신경보호효과와 행동검사 결과를 관찰하였다.
    본 연구에서 자하거 약침은 in vitro 실험에서 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP+)투여로 인한 신경세포 손상에 대하여 신경보호효과의 가능성을 보였다. 이를 근거로 시행한 in vivo 실험에서는 C57BL/6 mice를 사용하여 실험군을 정상군, 신경독소인 1-methyl-4-phenyl-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine(MPTP)만 주입한 군, 족삼리에 식염수를 주입하면서 MPTP를 주입한 군, 족삼리에 자하거 약침을 주입하면서 MPTP를 주입한 군의 4군으로 나누었다. 자하거 약침은 MPTP 주입 전에 양측 족삼리에 4주간 격일로 12회 주입하였고 자하거 약침 8회 시술 후부터 MPTP를 하루에 한 번 5일간 복강내 주입하여 중뇌의 흑질의 도파민 신경세포를 파괴하여 Parkinson 질병동물 모델을 만들어 자하거 약침의 세포손상에 대한 예방효과 및 신경보호효과를 관찰하였다. 실험이 끝난 후 행동검사는 pole test와 rota-rod test를 시행하였고 세포의 보존정도는 도파민 세포를 TH 면역조직 화학법을 통해 측정하였다.
    관찰결과 MPTP 투여 후 MPTP 투여군의 흑질의 도파민 세포수는 감소하였으나 자하거 약침을 투여한 경우에는 세포수가 유지되는 경향성을 보였으나 유의성은 없었다. 행동검사에서도 양호한 경향성은 나타내었으나 유의성이 나타나지 않았다.
    Parkinson 모델 실험을 통해 자하거 약침은 세포손상예방 및 신경보호효과의 가능성을 보였으나 유의성 있는 결과는 나타내지 못했으므로, 추후 적절한 경혈, 투여방법 및 최적의 농도를 찾는데 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료된다.

    Key words : Hominis Placenta herbal acupuncture, Parkinson’s disease, MPP+, MPTP, Behavioral test, TH-immunohistochemistry

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    다국어 초록 (Multilingual Abstract) kakao i 다국어 번역

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    Purpose : This study was designed to investigate the neuroprotective effects of Hominis Placenta(HP) on dopaminergic neurons.
    Methods : We examined the effect of in vitro administration of HP against 1-methyl-4-phenylpyridinium(MPP+)-induced dopaminergic cell loss in primary mesencephalic culture and also used behavioral tests and performed analysis in the striatum and the substantia nigra of mice brain, to confirm the effect of HP on dopaminergic neurons in an in vivo 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine(MPTP)-induced PD mouse model. Animals were assigned to four groups; (1) Group 1 (vehicle-treated group), (2) Group 2 (MPTP only treated group), (3) Group 3 (MPTP + saline-treated/ST36 group), (4) Group 4 (MPTP + HP-treated/ST36 group). HP at 20 μL of 48 mg/kg dose was injected at ST36 for 4 weeks at 2-day intervals. MPTP in saline was injected intraperitoneally per day for 5 days from 8th treatment of HP. We performed the pole test and rota-rod test, on the first and seventh day after the last MPTP injection. To investigate the effect of HP on dopaminergic neuron, we performed analysis in the striatum and the substantia nigra of mice brain after treatment of HP and/or MPTP.
    Results : Treatment with HP had no influence on cell proliferation and caused no cell toxicity in PC12 and HT22 cells. Our study showed that HP significantly prevented the cell loss and protected neurites against MPP+ toxicity. Although the in vivo treatment of HP herbal acupuncture at ST36 showed improvement tendency on movement ability and protected dopaminergic cells and fibers in the substantia nigra and the striatum, it did not show significant changes compared with the MPTP treated group.
    Conclusion : These data suggested that HP could be a potential treatment strategy in neurodegenerative diseases such as Parkinson’s disease.

    Key words : Hominis Placenta herbal acupuncture, Parkinson’s disease, MPP+, MPTP, Behavioral test, TH-immunohistochemistry
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    Purpose : This study was designed to investigate the neuroprotective effects of Hominis Placenta(HP) on dopaminergic neurons. Methods : We examined the effect of in vitro administration of HP against 1-methyl-4-phenylpyridinium(MPP+)-induced dopamine...

    Purpose : This study was designed to investigate the neuroprotective effects of Hominis Placenta(HP) on dopaminergic neurons.
    Methods : We examined the effect of in vitro administration of HP against 1-methyl-4-phenylpyridinium(MPP+)-induced dopaminergic cell loss in primary mesencephalic culture and also used behavioral tests and performed analysis in the striatum and the substantia nigra of mice brain, to confirm the effect of HP on dopaminergic neurons in an in vivo 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine(MPTP)-induced PD mouse model. Animals were assigned to four groups; (1) Group 1 (vehicle-treated group), (2) Group 2 (MPTP only treated group), (3) Group 3 (MPTP + saline-treated/ST36 group), (4) Group 4 (MPTP + HP-treated/ST36 group). HP at 20 μL of 48 mg/kg dose was injected at ST36 for 4 weeks at 2-day intervals. MPTP in saline was injected intraperitoneally per day for 5 days from 8th treatment of HP. We performed the pole test and rota-rod test, on the first and seventh day after the last MPTP injection. To investigate the effect of HP on dopaminergic neuron, we performed analysis in the striatum and the substantia nigra of mice brain after treatment of HP and/or MPTP.
    Results : Treatment with HP had no influence on cell proliferation and caused no cell toxicity in PC12 and HT22 cells. Our study showed that HP significantly prevented the cell loss and protected neurites against MPP+ toxicity. Although the in vivo treatment of HP herbal acupuncture at ST36 showed improvement tendency on movement ability and protected dopaminergic cells and fibers in the substantia nigra and the striatum, it did not show significant changes compared with the MPTP treated group.
    Conclusion : These data suggested that HP could be a potential treatment strategy in neurodegenerative diseases such as Parkinson’s disease.

    Key words : Hominis Placenta herbal acupuncture, Parkinson’s disease, MPP+, MPTP, Behavioral test, TH-immunohistochemistry

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    목차 (Table of Contents)

    • Ⅰ. Introduction.. 1
    • Ⅱ. Materials and methods 2
    • 1. Materials 2
    • 2. Cell cultures and treatment 2
    • 3. Measurement of cell viability 3
    • Ⅰ. Introduction.. 1
    • Ⅱ. Materials and methods 2
    • 1. Materials 2
    • 2. Cell cultures and treatment 2
    • 3. Measurement of cell viability 3
    • 4. Cultures of rat mesencephalic dopaminergic cells 3
    • 5. Animals and treatment 3
    • 6. Behavioral tests 4
    • 7. Brain tissue preparation 4
    • 8. Immunohistochemistry 4
    • 9. Statistical analysis 5
    • Ⅲ. Results 6
    • 1. Effects of HP on neuronal cell viability in neuronal culture 6
    • 2. Effects of HP on toxin-induced dopaminergic cell damage in primary mesencephalic culture 7
    • 3. Effects of HP on MPTP-induced behavioral changes in mice 10
    • 4. Effects of HP on MPTP-induced striatal dopaminergic neuronal degeneration in mice 12
    • Ⅳ. Discussion 15
    • Ⅴ. Conclusions 18
    • References 19
    • Abstract 24
    • 국문초록 25
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